fa بازدارندگی فلزات سنگین و حلال‌ها بر آنزیم اوره‌آز برای تولید آمونیاک در سنتز داروی ضدفشار خون نیفیدیپین تخصصي Special پژوهشي Research <strong><span style="font-family:b zar;">مقدمه:</span></strong><span style="font-family:b zar;"> رشد تکنولوژی‌ با مخاطرات زیست‌ محیطی</span> <span style="font-family:b zar;">بوسیله حلال‌های آلی و کاتالیست‌های سنتی همراه شده و لذا این مواد باید جای خود را به آب و بیوکاتالیست‌های زیست</span><span style="font-family:b nazanin;">‌</span><span style="font-family:b zar;"> سازگار بدهند. اوره</span><span style="font-family:b nazanin;">‌</span><span style="font-family:b zar;">آز، یک آنزیم هیدرولاز <a name="OLE_LINK2"></a><a name="OLE_LINK1">است</a></span> که اوره را به آمونیاک تبدیل می<span style="font-family:b nazanin;">‌</span><span style="font-family:b zar;">کند، پس مخلوط اوره</span><span style="font-family:b nazanin;">‌</span><span style="font-family:b zar;">آز-اوره در آب یک جایگزین مناسب برای ماده سمی آمونیاک در سنتز نیفیدیپین است که در حضور کاتالیست‌ها و حلال‌های آلی زیادی سنتز شده است. هدف این تحقیق، جایگزینی اوره</span><span style="font-family:b nazanin;">‌</span><span style="font-family:b zar;">آز</span><span style="font-family:b zar;">-</span><span style="font-family:b zar;">اوره و آب به جای آمونیاک و مطالعه بازدارندگی مهار‌کننده‌های فلزات سنگین و حلال‌ها روی آنزیم اوره</span><span style="font-family:b nazanin;">‌</span><span style="font-family:b zar;">آز برای تولید آمونیاک در سنتز داروی ضد</span><span style="font-family:b nazanin;">‌</span><span style="font-family:b zar;">فشار خون نیفیدیپین است.</span><br> <strong><span style="font-family:b zar;">روش</span></strong><span style="font-family:b zar;"> <strong>بررسی</strong>: در این روش کاملا</span><span style="font-family:b zar;">ً</span><span style="font-family:b zar;"> تجربی</span><span style="font-family:b zar;">، </span><span style="font-family:b zar;">با کنترل </span><span style="font-family:b zar;">بازده جداسازی/زمان واکنش سنتز نیفیدیپین از تراکم چهار جزئی متیل‌استواستات، 2-نیتروبنزالدهید و اوره‌آز-اوره در آب، شرایط بهینه مشخص و سپس با تغییر در فاکتورهای غلظت آنزیم، اوره، دما، </span><span dir="LTR">pH</span><span style="font-family:b zar;"> و بازدارنده‌های فلزات سنگین/حلال‌های آلی، اثرات آنها روی سنتز نیفیدیپین کاتالیست شده با اوره‌آز بررسی ‌شد. </span><br> <strong><span style="font-family:b zar;">یافته‌ها: </span></strong><span style="font-family:b zar;">بر اساس بازده </span><span style="font-family:b zar;">نیفیدیپین</span><span style="font-family:b zar;">، </span><span style="font-family:b zar;">فعالیت آنزیم اوره‌آز برای تولید آمونیاک به عواملی چون مقدار اوره-اوره‌آز، دما، </span><span dir="LTR">pH</span><span style="font-family:b zar;">، نوع و غلظت بازدارنده‌ بستگی دارد. اوره‌آز به‌طور ویژه سوبسترای اوره را با ماکزیمم فعالیت در شرایط </span><span dir="LTR">mg/mL</span><span style="font-family:b zar;"> 10 اوره‌آز، 7</span>=<span dir="LTR">pH</span><span style="font-family:b zar;"> و دمای </span>C&deg;<span style="font-family:b zar;"> 70 به آمونیاک تبدیل</span><span style="font-family:b nazanin;">‌</span><span style="font-family:b zar;">می‌کند و یون‌های فلزات سنگین و حلال</span><span style="font-family:b nazanin;">‌</span><span style="font-family:b zar;">های آلی با روند بازدارندگی </span><span dir="LTR">Hg²⁺>Ag⁺>Cu²⁺>Pb²⁺>Cd²⁺</span><span style="font-family:b zar;"> و استونیتریل</span><span style="font-family:cambria,serif;">></span><span style="font-family:b zar;">کلرو‌فرم</span><span style="font-family:cambria,serif;">></span><span style="font-family:b zar;">دی‌کلرو‌متان باعث کاهش فعالیت اوره‌آز و بازده نیفیدیپین می</span><span style="font-family:b nazanin;">‌</span><span style="font-family:b zar;">شوند. </span><br> <strong><span style="font-family:b zar;">نتیجه‌گیری:</span></strong> <span style="font-family:b zar;">اگر چه اوره‌‌آز-اوره یک منبع زیست</span><span style="font-family:b nazanin;">‌</span><span style="font-family:b zar;">سازگار آمونیاک در سنتز داروی ضدفشار خون نیفیدیپین در آب است، عوامل بازدارنده آنزیم اوره‌آز مانند یون‌های فلزات سنگین به ویژه جیوه و حلال‌های آلی باعث توقف این واکنش می‌شوند.</span> <span style="font-family:b zar;">زیست</span><span style="font-family:b nazanin;">‌</span><span style="font-family:b zar;">سازگاری کامل روش و کاتالیست، استفاده از حلال آب، انتخاب‌گری و بازده بالا، از مزایای این روش در مقایسه با روش‌های قبلی ‌است.</span><br> <span style="display: none;">&nbsp;</span> <strong>Introduction:</strong> Simultaneous development of technology is composed with environmental hazardous with heavy-metals and organic solvents and thus toxic catalysts/organic solvents must be replaced with biocatalysts and water. Urease is a hydrolase enzyme and urease-urea can be considered a safe source of toxic ammonia in synthesis of nifedipine. Nifedipine is an antihypertensive drug synthesized by four&ndash;component reaction of 2 mmol methyl acetoacetate, 2&ndash;nitro-benzaldehyde, and ammonia using catalysts and organic solvents. The object of this research is replacement of toxic ammonia with urease-urea and organic solvents with water and study of heavy-metals and organic-solvent inhibition of urease on the synthesis of nifedipine.<br> <strong>Methods</strong>: In this experimental work, by controlling of yield and time of nifedipine synthesis via reaction of methyl acetoacetate, 2&ndash;nitro-benzaldehyde, and urease/urea in water, optimum urease/urea concentration, temperature, and pH for maximum yield were determined. Then, the effect of heavy-metal/organic solvent inhibitors on the production of ammonia and urease-catalyzed synthesis of nifedipine have been investigated.<br> <strong>Results</strong>: Based on the yield of nifedipine, the activity of urease for ammonia production depends on parameters such as urease/urea amount, temperature, pH, and kind or concentration of inhibitors. The results accorded urease specificity for maximum dissociation of urea in experiment with 10 mg/mL urease, pH=7, and 70 <span dir="RTL">C&deg;</span> in water, while heavy-metal ion/organic solvent inhibitory of urease showed trends of Hg²⁺>Ag⁺>Cu²⁺>Pb²⁺>Cd²⁺ and acetonitrile>chloroform>dichloromethane to reduce in ammonia concentration and nifedipine.<br> <strong>Conclusion:</strong> Urease-urea makes a biocompatible source of ammonia for synthesis of anti&ndash;hypertension drug of nifedipine, while inhibitors such as heavy metal cations especially Hg²⁺, organic solvents, and sulfuric acid decrease the reaction rate. Biocompatibility, use of water and no organic solvent/catalyst, high yield and selectivity are advantages of this green method in comparison to previous reported methods.<br> &nbsp; اوره‌آز- اوره, بازدارندگی آنزیم, یون‌های فلزات سنگین, حلال‌های آلی, نیفیدیپین. Urease-Urea, Enzyme inhibition, Heavy metal ions, Organic solvents, Nifedipine. 96 104 http://tbj.ssu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1948-1&slc_lang=fa&sid=1 Fatemah Tamaddon فاطمه تمدن ftamaddon@yazd.ac.ir 0000-0000-0000-0000 Yes Yazd University دانشگاه یزد Mohammad Reza Noorbala محمدرضا نوربالا noorbala@yazd.ac.ir 0000-0000-0000-0000 No Yazd University دانشگاه یزد Davood Arab داوود عرب sami.gh999@gmail.com 0000-0000-0000-0000 No Yazd University دانشگاه یزد Somayeh Ghazi سمیه قاضی davodarab2@yahoo.com 0000-0000-0000-0000 No Yazd University دانشگاه یزد